【產品名稱】

通用名稱：真菌藥敏培養基（培養法）

英文名稱：無

【包裝規格】

【預期用途】

本品適用于真菌KB擴散法或Etest法藥敏試驗。

【檢驗原理】

將含有定量抗菌藥物的紙片，貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸收瓊脂中水分溶解后，不斷向紙片周圍擴散，形成遞減的梯度濃度，在紙片周圍抑菌濃度范圍內測試菌的生長被抑制，從而形成無菌生長的透明圈即為抑菌圈。

抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度，并與該藥對測試菌的MIC呈負相關關系。

【主要組成成份】

 由瓊脂培養基和一次性塑料培養皿組成。

 每1000mL真菌藥敏培養基含：

a)葡萄糖                   （AR級）      20.0g

b)MOPS（3-N-嗎啡啉丙磺酸）             （AR級）      40.0g

c)RPMI-1640培養基                   （BR級）      10.0g

d)瓊脂                           （BR級）     15.0g-20g

f)蒸餾水                                      1000mL

【儲存條件及有效期】
　　2℃～8℃保存，切勿凍藏。

在儲存條件下，自生產之日起有效期60天，開封后即時使用。

【樣本要求】

樣本必須是0.5麥氏比濁標準的細菌懸液（某些藥敏紙片可能還需要進一步稀釋才能制備成接種物，參照藥敏紙片的操作說明書要求）。

細菌懸液可通過生長法或直接菌落懸液法制備。

1、 生長法：

（1） 從瓊脂平板上選取至少3-5個形態特征一致的菌落，用接種環接觸每個菌落頂部后將細菌轉移到含4-5 ml適宜的肉湯培養管（如沙保羅氏肉湯）中。 

（2） 將此肉湯培養物置35℃孵育至其濁度等于或超過0.5麥氏標準（通常需2-6h）。

（3） 用無菌鹽水或肉湯，將旺盛生長的肉湯培養基的濁度調整到光學上相當于0.5麥氏標準。

2、 直接菌落懸液法：

此法為生長法的簡便替代方法，從孵育18-24小時的真菌培養基（如沙保羅氏瓊脂培養基）平板上，挑取單個菌落，直接用肉湯或鹽水制成懸液作為接種物，然后按上述方法將濁度調整至0.5麥氏標準。

【適用儀器】

   無

【檢驗方法】

1. 將培養基復溫至常溫25℃；

2. 接種物制備后15分鐘內接種：用無菌棉拭蘸取菌液，在管內壁液面上方旋轉緊壓，將多余菌液擠去，然后在瓊脂表面均勻涂布接種3次，每次旋轉平板60度以確保接種菌的均勻分布，最后沿平板內緣涂抹一周；

3. 接種好的平板，可敞開蓋子倒置在室溫下干燥3-5分鐘；

4. 在15分鐘之內，用紙片分配器或無菌鑷子，將紙片放入瓊脂表面并輕壓，使紙片與瓊脂表面完全接觸。各紙片中心相距應大于24mm；

加ETEST的操作，可參見ETEST操作說明書

5. 應在紙片貼好后15分鐘內將平板倒置放入35℃孵箱，若超過15分鐘將使紙片中的抗菌藥物提早擴散。

注：

1、 瓶裝的培養基需分裝成平板培養基后，再行使用；

2、 由于某些藥物在紙片放入瓊脂平板后幾乎立即擴散，所以一旦紙片放入后就不能再移動，若要重新放置，可用一個新的紙片放在平板的另一位置。

【參考值（參考范圍）】

用游標卡尺測量

【檢驗結果的解釋】

1. KB擴散法：用精確度為1mm的游標卡尺量取抑菌圈直徑。

根據NCCLS標準，作出“敏感”,“

耐藥”和“中介”的判斷。

l “敏感”即表示測試菌可被測定藥物常規劑量給藥后在體內達到的血藥濃度所抑制；

l “耐藥”即表示測試菌不能被在體內感染部位可能達到的抗菌藥物濃度所抑制，臨床治療無效。

l “中介”者提示該細菌對常規用藥體液或組織中的藥物濃度的反應率低于敏感株，使用高于正常給藥量有療效。 

2. Etest法：橢圓形抑菌圈邊緣與Etest條交叉處的藥物濃度標記即對該細菌的最低抑菌濃度。

l 

2.2.

【檢驗方法的局限性】

本產品僅適用于真菌藥敏試驗用。

【產品性能指標】

培養基接種質控菌株，生長情況應符合下表要求：