【產品名稱】

  通用名稱：即用MH瓊脂培養基（KB法）

  英文名稱：Mueller-Hinton Agar

【包裝規格】

【預期用途】

適用于用于普通細菌KB法擴散藥敏試驗。 

【檢驗原理】

將含有定量抗菌藥物的紙片，貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸收瓊脂中水分溶解后，不斷向紙片周圍擴散，形成遞減的梯度濃度，在紙片周圍抑菌濃度范圍內測試菌的生長被抑制，從而形成無菌生長的透明圈即為抑菌圈。

抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度，并與該藥對測試菌的MIC呈負相關關系。

 【主要組成成份】

    由瓊脂培養基和一次性塑料培養皿組成。
每1000mL瓊脂含：

酸水解酪蛋白         17.5g

牛肉浸出粉         2.0g

可溶性淀粉         1.5g

瓊脂               17.0g

【儲存條件及有效期】
　　2℃～8℃保存，切勿凍藏。

在儲存條件下，保質期60天，開封后即時使用，開封后即時使用。

【適用儀器】

   無

【樣本要求】

樣本必須是0.5麥氏比濁標準的細菌懸液。

細菌懸液可通過生長法或直接菌落懸液法制備。

1、 生長法：

（1） 從瓊脂平板上選取至少3-5個形態特征一致的菌落，用接種環接觸每個菌落頂部后將細菌轉移到含4-5 ml適宜的肉湯培養管（如胰酶消化大豆肉湯）中。 

（2） 將此肉湯培養物置35℃孵育至其濁度等于或超過0.5麥氏標準（通常需2-6h）。

（3） 用無菌鹽水或肉湯，將旺盛生長的肉湯培養基的濁度調整到光學上相當于0.5麥氏標準。

2、 直接菌落懸液法：

此法為生長法的簡便替代方法，從孵育18-24小時的非選擇性培養基（如血瓊脂）平板上，挑取單個菌落，直接用肉湯或鹽水制成懸液作為接種物，然后按上述方法將濁度調整至0.5麥氏標準。

【檢驗方法】

1. 將培養基復溫至常溫25℃；

2. 在接種物制備后15分鐘內接種：用無菌棉拭蘸取菌液，在管內壁液面上方旋轉緊壓，將多余菌液擠去，然后在瓊脂表面均勻涂布接種3次，每次旋轉平板60度以確保接種菌的均勻分布，最后沿平板內緣涂抹一周；

3. 接種好的平板，可敞開蓋子倒置在室溫下干燥3-5分鐘；

4. 在15分鐘之內，用紙片分配器或無菌鑷子，將紙片放入瓊脂表面并輕壓，使紙片與瓊脂表面完全接觸。各紙片中心相距應大于24mm，至多放置6-7個紙片；

5. 應在紙片貼好后15分鐘內將平板倒置放入35℃孵箱，若超過15分鐘將使紙片中的抗菌藥物提早擴散；

6. 必須孵育24小時以檢測對苯唑西林和萬古霉素的耐藥性，其他的非苛養菌可在孵育16-18小時后讀取結果。如果接種正確，抑菌圈呈透明圓環狀，菌苔生長的平面應該是均勻連續的，如出現明顯的單個菌落生長說明接種菌的濃度太低，應重新進行試驗。

注：

1、 由于某些藥物在紙片放入瓊脂平板后幾乎立即擴散，所以一旦紙片放入后就不能再移動，若要重新放置，可用一個新的紙片放在平板的另一位置。

【參考值（參考范圍）】

培養基接種質控菌株，培養24h后用游標卡尺測量，

【檢驗結果的解釋】

用精確度為1mm的游標卡尺量取抑菌圈直徑。

根據CLSI標準，作出“敏感”,“

耐藥”和“中介”的判斷。

l “敏感”即表示測試菌可被測定藥物常規劑量給藥后在體內達到的血藥濃度所抑制；

l “耐藥”即表示測試菌不能被在體內感染部位可能達到的抗菌藥物濃度所抑制，臨床治療無效。

l “中介”者提示該細菌對常規用藥體液或組織中的藥物濃度的反應率低于敏感株，使用高于正常給藥量有療效。 

注意：

1、 抑菌圈的直徑（包含紙片的直徑）可用直尺或游標卡尺測量，讀取最近的整毫米數。

2、 測量時將尺子放在倒置的平板上，置平板在黑色無反射背景上方幾寸處并用反射光照明。

【檢驗方法的局限性】

1、 只應用于快速生長菌，不可用于緩慢生長菌、需要增加CO₂濃度的挑剔性細菌和厭氧性細菌；

2、 必須加以標準化進行試驗，如：紙片抗生素的濃度、樣本的濁度等。

【產品性能指標】

培養基接種質控菌株，生長情況應符合下表要求：